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- 產(chǎn)品名稱： M-MLV(H-) Reverse Transcriptase
- 產(chǎn)品貨號： CSRT0910
- 貨期： 現(xiàn)貨
- 價格與訂購： 400
- 數(shù)量：
庫存： 100
- 規(guī)格： 10KU
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
產(chǎn)品概述
M-MLV(H-) Reverse Transcriptase是通過體外大腸桿菌表達(dá)體系分子進(jìn)化技術(shù)篩選獲得的全新逆轉(zhuǎn)錄酶，與原始逆轉(zhuǎn)錄酶相比，MMLV(H-) Reverse Transcriptase大幅提高了熱穩(wěn)定性，在50℃的半衰期超過4h，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高至50-55℃，避免RNA復(fù)雜二級
結(jié)構(gòu)對cDNA合成的抑制，可有效合成高質(zhì)量的cDNA。同時，M-MLV(H-) Reverse Transcriptase增加了多個點(diǎn)突變，增強(qiáng)了模板親和
力和行進(jìn)性，使得全長cDNA的合成能力有了大幅度提升，對于常見的逆轉(zhuǎn)錄抑制物具有更高的耐受度，非常適合于富含多糖多酚的植
物組織RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
產(chǎn)品組分
| 組 分 | CSRT0910 (10,000 U) |
| M-MLV(H-) Reverse Transcriptase (200 U/μl) | 50 μl |
保存條件
-30 ~ -15℃保存，≤0℃運(yùn)輸。
適用范圍
本產(chǎn)品廣泛適用于動物、植物以及微生物RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
適用場景
RT-PCR擴(kuò)增；
鏈cDNA合成；
制備cDNA探針；
合成具有高比例全長cDNAs的cDNA文庫。
單位定義
以Poly(rA)·Oligo(dT)為模板/引物，在37℃，10 min條件下，摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。
注意事項
防止RNase污染
請保持實驗區(qū)域潔凈；操作時需穿戴干凈的手套、口罩；實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。
引物選擇
1.后續(xù)實驗為PCR
如果模板為真核生物來源，一般情況下首選Oligo dT，與真核生物mRNA的3' Poly A尾配對，可獲得最高產(chǎn)量的全長cDNA。
基因特異性引物(GSP)的特異性最高。但有些情況下，用于PCR反應(yīng)的GSP無法有效引導(dǎo)第一鏈cDNA合成。這時，可改用Oligo dT或
Random hexamers重新進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。
Random hexamers特異性最低，所有RNA，包括mRNA，rRNA，tRNA均可以作為Random hexamers的模板。當(dāng)目標(biāo)區(qū)域具有復(fù)雜
二級結(jié)構(gòu)或GC含量較高，或模板為原核生物來源，使用Oligo dT或基因特異性引物(GSP)無法有效引導(dǎo)cDNA合成時，可使用Random
hexamers為引物。
2.后續(xù)實驗為qPCR
將Oligo dT與Random hexamers混合使用，可使mRNA的各個區(qū)域cDNA合成效率相同，有助于提高定量結(jié)果的真實性和重復(fù)性。
Note
For research use only .
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